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工程细胞

Applied Cell™ 杂交瘤细胞无血清培养基

目录价:368元

货号:AC-1003001
规格:500mL
保存条件:2-8℃
使用范围:杂交瘤细胞培养与传代
保质期:12个月

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  • 产品手册
  • 质检报告
产品简介

      杂交瘤细胞培养基是埃泽思生物科技有限公司(Applied Cell™)科技有限公司自主研发的一款无血清的工程细胞培养基。用于杂交瘤细胞的培养,以获取特定的单克隆抗体。使用杂交瘤细胞无血清培养基可极大简化后期蛋白纯化的环节,获得高表达量的单克隆抗体。

     杂交瘤细胞培养基主要成分:氨基酸,维生素、无机盐、人白蛋白,转铁蛋白、胰岛素、微量元素等。

产品特性
可用于杂交瘤细胞培养,一般不需要训化,但训化可显著提高细胞活率。
培养基中蛋白含量低,有利于抗体表达纯化。

培养基内毒素小于0.25EU/mL,减少了腹水条件下去除内毒素的操作。


产品内容

细胞种类

最高细胞密度

最高细胞活率

1号株

7。09 ×106/mL

93.47%

2号株

4。65×106/mL

95。44%





产品性能指标

PH值:7.0-7.4
渗透压:270-350mOsm/kg
无菌:霉菌、细菌不得检出
内毒素:<0.25EU/mL
外观:橘红色澄清液体

相关产品

Serum-Free细胞冻存液Applied Cell™: Cat. no.AC-1001005/AC-1001006


使用说明
1. 使用前将培养基适当分装,储存于2-8℃,使用时37℃平衡20min
2. 本培养基无需添加血清,对于采用血清及血清替代物培养的杂交瘤细胞,可适当添加少量血清 ,并逐步降低血清含量直到降至无血清培养,可有助提高细胞活率。
3. 与血清培养基相比,本产品在培养某些杂交瘤细胞时,需提前训化,如直接培养,生长效果不能达到最佳。

培养方法
培养器皿:以60mm培养皿为例
1.复苏细胞后,以5×105cells/mL,接种于60mm培养皿,接种4mL培养基。
2.待细胞密度达到1.5-2×106cells/mL时,(期间根据培养基颜色变化及细胞密度可适当补液),收集细胞于15mL离心管中。
3。1000rpm/min离心3min,去上清,加新鲜培养基重悬。
4.细胞悬液等量分别接种于3个60mm培养皿,补足培养基至4mL
5.传代后细胞1-3天可继续传代,(期间可适当更换培养基或补液)。
最佳接种密度:5-7×105cells/mL    培养条件:37℃,5%CO2
最佳传代密度:1-2×106cells/mL   传代后最佳密度:5-7×105cells/mL
特别提示:如进行抗体表达量检测,一般情况抗体表达高点会在细胞峰值后的1-2天,建议在峰值前1-2天,和峰值后1-2天都收集细胞上清,备用检测。

细胞冻存及复苏
细胞冻存步骤:
1.将细胞悬液计数,1000rpm/min离心3min,弃上清
2.将4℃预冷的serum-free细胞冻存液(Applied Cell: AC-1001005/AC-1001006)缓慢加入细胞中,根据细胞密度调节冻存液的量后重悬。
3。将细胞悬液分装于冻存管中,每管800µL-1000µL
4.将分装好的冻存管密封,直接置于-80℃冰箱过夜,次日置于液氨中保存即可。
备注:如用含血清冻存液请注意冻存过程需要程序降温。
细胞复苏过程:
1。提前开启水浴锅,升温至37℃
2.将冻存的细胞从液氨中取出,快速置于水浴锅中,摇动融化(融化过程尽量在1min内完成)。
3.将含细胞的冻存液吸出,缓慢加入含有新鲜培养基的离心管中混匀,(冻存液体积:新鲜培养基体积=1:5)。
4。1000rpm/min,离心3min弃上清,加入新鲜培养基重悬。
5.细胞悬液分皿后,置于37℃,5%CO2培养箱中培养。

实验技术参数
细胞状态:


杂交瘤生长曲线:

无血清静态培养:




静态培养条件:接种密度:1×106/mL,根据细胞密度换液处理。
活细胞密度峰值:1号株:6.41×106/mL   2号株:7.09×106/mL
细胞存活率峰值:1号株95.44%         2号株:93。47%

培养皿静态培养:


静态培养条件:60mm培养皿,5mL 培养基,接种密度:1×105/mL,连续7天不换液处理。
活细胞密度峰值:2.21×106/mL
细胞存活率峰值:89.4%

摇瓶动态培养:


动态培养条件:125mL培养摇瓶,30mL培养基,接种密度:1×105/mL,连续7天不换液处理。
活细胞密度峰值:2.36×106/mL
细胞存活率峰值:88。38% 

质量控制

  

  

澄清

PH

7。0-7。4

 /mOsm/kg

280-320

EU/ml

<0.06

细菌,真菌

0.1µm过滤无菌检测合格

支原体

0.1µm过滤,支原体检测为阴性,

细胞生长试验

合格




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