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多能干细胞

Applied Cell™ 人多能干细胞消化液

目录价:268元

货号:AC-1001008

规格:100mL
运输保存条件:2-8℃,冰袋运输
使用范围:人多能干细胞(ES/iPS)消化后传代、冻存
保质期:12个月

  • 产品简介
  • 产品手册
  • 质检报告
产品简介

        人多能干细胞消化液是埃泽思生物科技有限公司(Applied Cell™)自主研发的一款不含蛋白消化酶、专业应用于人多能干细胞消化传代的产品。本产品为温和高效型消化液,最大限度减少对干细胞消化损伤,传代存活率高,且消化时间3-5min即可,和传统细胞传代方法相比,简化细胞传代过程。本产品生产过程遵循ISO9001体系,并符合GMP指导原则。

产品特性
温和高效,传代存活率高。

简化细胞传代过程,省去挑克隆的操作。


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       Serum-Free干细胞冻存液(Applied Cell™: Cat. no.AC-1001011/AC-1001012



操作方法(此次操作以6孔板为例)

1) 清洗准备预传代细胞,贴缓慢加入预热2 mL PBS缓冲液并轻轻晃动,然后沿培养皿边缘吸去PBS缓冲液

2) 消化:在6孔板中加入2 mL消化液使之覆盖皿底,并置于CO2培养箱中孵育2~5 min

注意:细胞密度不同,消化时间略有调整,在显微镜下观察到大部分克隆边缘以及克隆内部细胞间出现间隙,即刻吸掉消化液停止消化。

3)吹打:吸掉人多能干细胞消化液后,立刻加入平衡好的 2mL干细胞培养基,用移液枪扇形吹打6孔板底,吹吸次数保持在3~5次,使皿底贴附的干细胞集落脱落,轻柔缓慢吹吸混匀,制成干细胞悬液,并将其转移到15mL离心管中;

注意:吹细胞要轻柔,吹打次数在3~5次为宜,尽量避免形成单细胞。如有少量细胞无法从皿底脱落,属于正常现象。如有大量细胞无法从皿底脱落,需延长消化时间。

4)干细胞消化后,可以继续进行传代接种,也可以将干细胞进行冻存,步骤如下:

接种1000 rpm/min离心3 min,弃上清,用室温平衡好的干细胞培养基吹打重悬细胞5-10次,并转移至包被好的培养板中每孔2ml培养基。接种后显微镜下观察干细胞密度以及细胞团块大小,一般4个细胞以上的团块较合格,水平十字轻轻晃动6孔板,使细胞分布均匀。并置于CO2恒温培养箱培养,第2天观察细胞贴壁情况,24h换液一次

冻存:1000 rpm/min离心3 min,弃上清,加入2mL Serum-Free干细胞冻存液(AC-1001011/AC-1001012重悬3~5次后,将其加入2mL冻存管中注意:冻存液即用即拿,及时放回4℃冰箱。)。在冻存管上标记冻存细胞种类、时间、操作者及细胞批次,冻存管置于-80℃冰箱过夜,24h将其转至于液氮中进行长期保存。




质量控制


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